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형광 강도 검출은 흡광도 검출보다 훨씬 광범위한 응용 범위를 갖습니다. 형광 강도 측정의 경우 광학 시스템(여기 시스템)에서 특정 파장을 시료에 조사합니다. 여기 파장은 광학 필터 또는 모노크로메이터를 통해 선택되어 시료를 여기 상태로 만듭니다. 여기 상태로 인해 시료가 다른 파장에서 빛(즉, 형광)을 방출합니다. 방출된 빛은 두 번째 광학 시스템(방출 시스템)에 의해 수집되고 신호는 광전자 증배관(PMT)과 같은 광 검출기를 이용해 측정됩니다.
흡광도 검출과 비교하여 형광 검출의 장점은 오늘날 사용 가능한 형광 라벨의 광범위한 선택을 고려할 때 적용 범위가 넓고 감도가 증가한다는 것입니다. 예를 들어, 칼슘 이미징이라고 알려진 기술은 세포 내 칼슘 수준을 평가하기 위해 칼슘에 민감한 염료의 형광 강도를 측정합니다. (Fluorescence Microplate Reader)
그림 1: 시료는 형광 태그로 화학적으로 결합되어 마이크로플레이트 well에 추가됩니다
그림 2: 시료 내 형광 분자는 적절한 파장 범위로 여기 됩니다
그림 3: 방출된 빛은 PMT를 통해 캡처되고 정량됩니다
가시광선 또는 UV-Vis 스펙트럼 범위에서 검출이 필요한 마이크로플레이트 기반 어세이는 마이크로플레이트 리더를 사용한 자동화에 적합한 후보입니다. 가장 일반적인 흡광도 기반 어세이에는 ELISA, 키네틱 ELISA, Bradford 단백질, DNA/RNA 정량화, 단백질 정량화, Lowry 단백질, DNA 순도 평가, 효모 성장 및 미생물 성장 등이 있습니다. Agilent BioTek은 원활한 비색 및 탁도 어세이를 위해 다양한 흡광 리더를 제공합니다.
흡광 어세이는 일반적으로 한 번에 하나의 96웰 또는 384웰 마이크로플레이트에서 측정되지만, 일부 시스템은 여러 플레이트에서 특정 워크플로를 처리하도록 설계되었습니다.
예를 들어, 미생물 성장 어세이는 Agilent BioTek LogPhase 600 미생물 리더를 사용하여 한 번에 최대 4개의 마이크로플레이트에서 쉽게 구현할 수 있습니다.
Agilent BioTek의 필터 기반 마이크로플레이트 리더 (Microplate Reader)에는 다음과 같은 이점이 포함됩니다.
1. EPOCH 흡광 리더
유지보수가 간편하고 내구성이 우수
우수한 성능
1-4 마이크로플레이트 용량
목적에 맞게 제작된 진탕 및 배양
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